输血前不规则抗体鉴定结果分析与临床输血安全

来源期刊：广州医药 | 1087-1093 发布时间：2025-08-20 收稿时间：2025/9/22 16:10:07 阅读量：30

作者：: 罗俊轩,

梁倩妮,

罗斯威,

杨芳菲,

关键词：: 不规则抗体自身抗体同种抗体输血安全; irregular antibody autoantibody alloantibody transfusion safety

DOI：: 10. 20223 / j. cnki. 1000-8535. 2025. 08. 011

收稿时间：: 2024-09-13
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引用总数：: 2

目的明确输血前各抗体的分布特点，探讨自身抗体和同种抗体在性别、年龄、输血史、妊娠史和不同疾病中的差异，并根据抗体血型血清学特性制定个体输血方案，以确保临床输血安全。方法选取2021年6月—2024年8月在广东省第二人民医院输血科申请输注红细胞或手术备血的29 662例患者，采用低离子抗人球蛋白微柱凝胶法进行不规则抗体筛查，结果阳性的标本经科内讨论并送广州血液中心血型参比实验室进行抗体鉴定，通过统计血液中心回报结果分析各抗体的特异性。结果 29 662例患者标本中不规则抗体结果为阳性的有208例，阳性率为0.70%。同种抗体占比47.69%，Rh、MNS和Lewis红细胞血型系统共占同种抗体中的94.50%，其中常见意外抗体：抗-E占31.87%、抗-M占14.29%、抗-Mur占19.78%、抗-C占7.69%和抗-e占7.69%。同种抗体与自身抗体在性别、年龄、妊娠史等方面比较差异无统计学意义（P＞0.05）；在输血史及不同科室疾病等方面比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论输血前进行输血相容性检测是必要的，应对拟申请红细胞的患者进行不规则抗体筛查，阳性者宜进行抗体鉴定，明确其抗体的特异性及临床意义，以确保临床输血安全。

Objective To clarify the distribution characteristics of each antibody before transfusion，to explore the differences between autoantibodies and homologous antibodies in gender，age，history of blood transfusion，history of pregnancy and different diseases，and to formulate individual transfusion protocols based on the serological characteristics of antibody blood groups to ensure the safety of clinical blood transfusion．Methods A total of 29 662 patients who applied for red blood cell transfusion or surgical blood preparation in the hospital from June 2021 to August 2024 were selected for irregular antibody screening by low-ion anti-human globulin microcolumn gel method．The samples with positive results were discussed within the department and sent to the Blood Type Reference Laboratory of Guangzhou Blood Center for antibody identification．The specificity of each antibody was analyzed by blood center reported results．Results Among 29 662 patients，208 were positive for irregular antibody，the positive rate was 0.70%．The alloantibodies accounted for 47.69%，Rh，MNS and Lewis erythrocyte blood group system accounted for 94.50% of alloantibodies，among which the common unexpected antibodies were anti-E 31.87%，anti-M 14.29%，anti-MUR 19.78%，anti-C 7.69% and anti-E 7.69%．There were no significant differences between alloantibodies and autoantibodies in gender，age and pregnancy history（P＞0.05）．There were statistically significant differences in blood transfusion history and diseases in different departments（P＜0.05）．Conclusions It is necessary to test the compatibility of blood transfusion before transfusion．Screening for irregular antibodies should be carried out in prospective transfusion patients，and antibody identification should be carried out in positive patients to clarify the specificity and clinical significance of their antibodies to ensure the safety of clinical transfusion．

临床输血作为现代医学的重要治疗手段，在抢救生命、治疗疾病等方面发挥着不可或缺的作用。它能够迅速补充患者体内流失的血液，维持生命活动的正常运转，因此在医学治疗得到了广泛的应用。为确保患者临床输血安全，输血前进行输血相容性检测是必要的，其内容包括血型鉴定、不规则抗体鉴定、交叉配血。抗体鉴定主要目的是检测患者体内是否存在同种抗体，结合抗体特性分析其是否具有临床意义。按照抗体产生的规律可分为规则抗体和不规则抗体。规则抗体指的是ABO血型抗体^［1］，它的产生符合Landsteiner规则。不规则抗体是指正常ABO血型中抗A、抗B以外的血型抗体。不规则抗体包括同种抗体和自身抗体^［2］。同种抗体是指针对自身缺少的抗原产生相应的抗体。自身抗体是指对自身拥有或者没有的抗原产生的抗体。面对如此复杂的抗体，在临床输血时应针对不同抗体特性制定个体化临床输血方案。本研究对130例输血前不规则抗体阳性案例进行探讨，分析意外抗体分布特点，旨在提高输血疗效和确保临床输血安全^［3］。现将不规则抗体鉴定结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2021年6月—2024年8月在广东省第二人民医院申请输注红细胞或手术备血的29 662例患者，每例患者用EDTA-K2抗凝管采集2~3 mL静脉血标本，进行输血前输血相容性检测。输血相容性检测中不规则抗体筛查结果阳性者则纳入本研究，结果阴性者则排除。本研究经广东省第二人民医院伦理委员会同意符合“不增加受试者风险”、“不大于最小风险”的标准，豁免患者知情同意。本研究同时通过伦理委员会审查并同意（审查项目编号：2024-KY-KZ-325-01）。

1.2 仪器与试剂

1.2.1 仪器输血相容性检测试验采用瑞士BIO-RAD IH1000全自动血型仪、BIO-RAD凝胶卡专用离心机、BIO-RAD37 ℃凝胶卡专用恒温孵育器、日本久保田KUBOTA输血专用离心机KA-2200和白洋标本离心机。

1.2.2 试剂实验中抗体筛查细胞（Ⅰ号、Ⅱ号、Ⅲ号）分别购自瑞士BIO-RAD和上海血液生物公司产品，低离子抗人球蛋白卡购自瑞士BIO-RAD。

1.3 实验方法

1.3.1 微柱凝胶法使用BIO-RAD IH1000全自动血型仪，运用低离子抗人球蛋白微柱凝胶法对患者样本进行输血相容性试验检测，对仪器结果进行判读并记录。上述操作严格按照广东省第二人民医院《输血科标准操作规程GD2H-SX-03-08》文件执行，符合《全国临床检验操作规程》^［4］文件要求，结果阳性的标本经科内讨论并送广州血液中心血型参比实验室进行抗体鉴定。

1.3.2 聚凝胺法在标记好的试管中加入受血者血清2滴，按标记加对应的3%抗筛试剂红细胞1滴于相应试管中混合。在上述已加好反应物的试管中各加入低离子介质试剂0.6 mL，混匀后再加聚凝胺液2滴，混匀30 s后，以1 000 xg离心力离心15 s，弃上清，轻荡后观察。若出现凝集说明试剂及试验有效，加入2滴重悬液记录实验结果。上述操作严格按照广东省第二人民医院《输血科标准操作规程GD2H-SX-03-08》文件执行，符合《全国临床检验操作规程》文件要求，结果阳性的标本经科内讨论并送广州血液中心血型参比实验室进行抗体鉴定。

1.3.3 统计学方法数据采用SPSS 22.0统计软件进行处理，设计基线资料调查表。分别使用

、n（%）形式记录计量资料和计数资料，统计完成后以t检验、χ²检验对比^［5］，以α=0.05为检验水准。

2 结果

2.1 血型不规则抗体的阳性率

在申请输注红细胞或手术备血的29 662例患者标本中，输血相容性检测检出不规则抗体阳性208例，阳性率为0.70%。

2.2 不规则抗体筛查阳性标本送检鉴定结果

将反复申请输注红细胞且不规则抗体鉴定结果未提示出现新抗体，或交叉配血正常未提示出现新抗体的同一个患者抗体鉴定结果进行整合，共检出有临床意义的抗体130例。以同种抗体居多（占47.69%）；抗筛阳性患者中常见的结果为温自身抗体（20%）、抗-E（16.15%）、抗-M（9.23%）、抗-Mur（7.69%）占总数的53.07%。见表1。

表1 130例不规则抗体特异性鉴定结果 [n（%）]

抗体鉴定结果	阳性	合计
自身抗体		32（24.62）
温自身抗体	26（20.0）
冷自身抗体	6（4.62）

同种抗体		62（47.69）
抗-E	21（16.15）
抗-E+P1	1（0.78）
抗-E+Leb	1（0.78）
抗-E+Leb+Mur	1（0.78）
抗-E+Mur	2（1.54）
抗-cE	2（1.54）
抗-cE+Jka+Mur	1（0.78）
抗-Ce	5（3.85）
抗-Ce+Mur	1（0.78）
抗-D	2（1.54）
抗-M	12（9.23）
抗-Mur	10（7.69）
抗-Mur+Di（a）	1（0.78）
抗-Leb	1（0.78）
抗-P1	1（0.78）
自身抗体+同种抗体		8（6.15）
温自身抗体+Ce	1（0.78）
温自身抗体+M	1（0.78）
温自身抗体+Mur	1（0.78）
温自身抗体+Jka	1（0.78）
温自身抗体+Lea	1（0.78）
温自身抗体+Lea+Leb	1（0.78）
冷自身抗体+c	1（0.78）
冷自身抗体+Mur	1（0.78）
非特异性抗体(药物抗体抗CD-38等)	28（21.54）	28（21.54）

2.3 不同红细胞血型系统中的抗体特异性分布

在抗体鉴定结果为同种抗体的患者中，常见分布于Rh、MNS和Lewis红细胞血型系统，分别占53.84%、34.07%、6.59%，共占94.5%，其中抗-E（31.87%）、抗-Mur（19.78%）和抗-M（14.29%）较常见。见表2。

表2 91例同种抗体的特异性抗体分布 [n（%）]

红细胞血型系统	特异性抗体	阳性	合计
Rh			49（53.84）
	E	29（31.87）
	C	7（7.69）
	c	4（4.39）
	e	7（7.69）
	D	2（2.20）
MNS			31（34.07）
	M	13（14.29）
	Mur	18（19.78）
Lewis			6（6.59）
	Lea	2（2.20）
	Leb	4（4.40）
Kidd			2（2.20）
	Jka	2（2.20）
P			2（2.20）
	P1	2（2.20）
Diego			1（1.10）
	Di（a）	1（1.10）

2.4 自身抗体、同种抗体与患者之间的关系

抗体鉴定结果为自身抗体的患者40例，结果为同种抗体的患者70例。不同抗体患者在性别、年龄、有无妊娠/分娩史比较差异均无统计学意义（P＞0.05）；在有无输血史比较差异具有统计学意义（χ ² =10.02，P=0.001 5）。见表3。

表3 自身抗体、同种抗体与患者之间的关系 [n(%)，,]

类别	自身抗体	同种抗体	c2	P
性别			0.07	0.80
男性	17(16.67)	28(27.45)
女性	23(22.55)	42(41.18)
年龄	63.28±16.29	55.84±20.30		0.44
输血史	19(18.62)	54(52.93)	10.02	0.0015
妊娠史	18(17.65)	44(43.14)	3.30	0.70

2.5 输血史、妊娠/分娩史与不同抗体之间的关系

输血史和妊娠/分娩史在产生自身抗体患者、产生同种抗体患者上比较差异上无统计学意义。具体见表4。

表4 输血史、妊娠/分娩史与不同抗体之间的关系 [n(%)]

类别	输血史	妊娠/分娩史	c2	P
自身抗体	19(18.62)	18(17.65)	0.02	>0.05
同种抗体	54(52.93)	44(43.14)	0.15	0.70

2.6 自身抗体、同种抗体分布于不同患者疾病科室的差异

自身抗体多见于血液科和心胸外科；同种抗体多见于妇产科、重症医学科和骨外科。见表5。

表5 自身抗体、同种抗体分布于不同患者疾病科室的差异 [n(%)]

疾病种类	抗体类型
疾病种类	自身抗体（n=40）	同种抗体（n=70）
血液科	29（72.5）	2（2.86）
妇产科	0（0）	16（22.86）
重症医学科	1（2.5）	13（18.57）
风湿免疫科	0（0）	3（4.29）
骨外科	2（5.0）	11（15.71）
心胸外科	6（15.0）	8（11.43）
其余内科	1（2.5）	8（11.43）
其余外科	1（2.5）	9（12.86）

3 讨论

依照《中华人民共和国卫生行业标准》WS/T794-2022输血相容性检测标准及《临床输血技术规范》内容要求，输血前进行输血相容性检测应对患者进行红细胞抗体筛查，以检出具有临床意义的意外抗体^［6］。不规则抗体筛查及鉴定在临床输血工作中是必要的，为进一步了解临床患者中不规则抗体阳性的分布特性，为疑难配血提供策略以确保及时、安全和有效地临床用血，所以开展本研究讨论。

本研究29 662例患者标本中不规则抗体阳性208例，阳性率为0.70%，与健康人群中检出率为0.3%~2.0%的报道相符合^［7］，与叶巧国等^［8］报道接近，低于国内杨秀华等^［9］、候瑞琴等报道^［10］。剔除反复申请输注红细胞且不规则抗体鉴定结果，未提示出现新抗体或交叉配血正常未提示出现新抗体的同一个患者抗体鉴定结果进行整合，共检出有临床意义的抗体130例。其中包括自身抗体32例、同种抗体62例、自身抗体合并同种抗体8例和非特异性抗体（药物抗体抗-CD38等）28例。同种抗体占多数，这与国内外多篇报道结果保持一致^［10］。在不同红细胞血型系统中的抗体特异性分布中，分布于Rh、MNS和Lewis红细胞血型系统共占94.5%，其中抗-E（31.87%）、抗-Mur（19.78%）和抗-M（14.29%）较常见，与既往报道一致^［11-12］。其中有1例抗体鉴定结果为抗Di（a），该抗体属于Diego血型系统，其免疫产生的IgG型可引起溶血性输血反应及轻重程度不同的新生儿溶血病^［13］。不规则抗体的出现频率及其特异性抗体分布具有地区和种族的差异性^［14］，本研究并未能统计到更多的红细胞血型系统抗原抗体，如Duffy、Kell等。可能与Duffy和Kell抗原在东方人群甚至国人中低表达有关，有报道称国人抗K抗原阳性率为0.79%，缺乏抗原的免疫原性，抗体的产生概率也会明显降低^［15］。

本研究通过统计不规则抗体鉴定结果，发现自身抗体及自身抗体合并同种抗体例数较之前有增加趋势，所以本文增加了对该抗体的统计。本研究为国内少有将自身抗体和同种抗体进行了分组比较^［10］。在自身抗体、同种抗体与患者之间关系的统计中：性别、年龄和妊娠/分娩史在产生自身抗体和产生同种抗体之间的差异没有统计学意义（P＞0.05）；在输血史方面的差异有统计学意义（χ ² =10.02，P=0.0015）。自身抗体、同种抗体在不同疾病患者分布中具有明显差异（P＜0.05），自身抗体多见于血液科（72.5%）；同种抗体多见于妇产科（22.86%）、重症医学科（18.57%）和骨外科（15.71%）。导致该差异可能与抗体的产生机制有关：自身抗体产生的原因常见的有免疫性疾病、感染、药物治疗以及恶性肿瘤疾病等，多为自身免疫系统攻击产生^［16］；同种抗体产生的原因则常发生输血、妊娠、注射等情况下，而不与抗体产生者的红细胞之间发生反应，多为异体免疫产生。在妊娠/分娩史的差异无统计学意义：可能是该过程不一定有抗原暴露；亦可能为本研究统计数量有限，数据未能全面反映。

患者体内由于存在自身抗体或同种抗体，可能会影响血型鉴定、抗体鉴定和交叉配血，使输血前相容性检测试验变得更为复杂。若不能明确体内抗体的类型及临床意义并及时给临床患者发出有效血液制品，可能会因输血延误患者救治甚至危及生命^［17-18］。有鉴于此，现结合国内外研究进展对上述常见的输血前不规则抗体阳性致交叉配血困难的情况，归纳有效的应对策略：（1）抗体筛查结果阳性，自身对照阳性，最常见的情况是体内存在自身抗体^［19］，目前DAT阳性患者交叉配血是输血研究的重点^［20］。可通过改变实验温度、直接抗人球蛋白实验和放散液结果对温冷自身抗体进行鉴别。抗筛及自身全阳情况的检测重点是检测自身抗体是否遮蔽了同种抗体的存在，所以需要先除去游离的自身抗体成分后再鉴别有无同种抗体的存在。常用自身红细胞吸收法，和异体红细胞吸附法，亦可用稀释法和预温法对IgM类同种抗体进行鉴定。对于IgG类同种抗体鉴定可用自体吸收法、异体吸收法、微热放散法、聚乙二醇吸收法和稀释法。若自身抗体具有抗体特异性时，应用酸放散或者56 ℃热放散的方法将患者洗涤后红细胞表面的自身抗体放散出来后再进行不规则抗体鉴定，若反应强度有不一致则可能被认为是同种特异性自身抗体。如上所述，根据相应步骤鉴别温冷抗体，以及是否存在同种抗体并鉴定该抗体的特性；若存在同种抗体则选择相应抗原阴性的红细胞进行相容性输注^［21］，对于该类患者，预防性输注抗原相匹配红细胞的输血方案是可行的，可将尽可能多的红细胞抗原系统考虑在内^［19］；若鉴定结果为自身抗体且不存在同种抗体时，则选择与吸附后的血清交叉配血结果为相合的去白细胞悬浮红细胞或洗涤红细胞输注即可。（2）抗体筛查结果阳性，自身对照阴性时，常见的情况是体内存在同种抗体，进行抗体鉴定明确抗体的特异性及临床意义，临床输血可选择避开对应抗原抗体反应的红细胞进行输注。（3）单抗药物治疗干扰致抗体筛查阳性，常见的如抗-CD38，抗-CD38可与所有红细胞发生反应影响抗体筛查、鉴定及交叉配血^［22］，采用0.2 mol/L的DTT溶液对试剂红细胞和献血员红细胞进行处理后，破坏了其表面的CD38抗原分子，取得了较好的实验结果；抗体筛选实验和抗体鉴定实验由处理前的全阳性变为了处理后的全阴性；交叉配血实验由处理前的不相合变为了处理后的全相合^［23］，交叉配血结果相合则可供临床输注。

综上所述，输血前不规则抗体筛查试验结果为阳性的患者，进一步做抗体鉴定是有必要的，明确抗体的特性、种类和临床意义，指导交叉配血节省时间以及精准选择合适的血液用于临床，确保安全有效地输血。自实施《临床输血技术操作规范》以来，基本做到了ABO、RhD血型的同型输注，Rh血型系统中的D抗原是临床上引起严重新生儿溶血病和溶血性输血反应最重要的血型抗原^［24］。但从报道可见，除抗-D外，抗-E、抗-C、抗-e和抗-M为最常见抗体。在临床实践中，随机交叉配血的情况下可能会增加Rh和MNS等血型系统异体免疫刺激，增加输血后抗体产生的风险，致使输血前相容性检测变得复杂而延误救治。对此建议，在地方血液中心及医院开展Rh、MNS分型常规检测以及Rh、MNS表型配合性输血，避免因长期输血产生的免疫刺激，减少特异性抗体产生的概率以及血液制品的浪费，值得在临床推广应用^［25］。

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